I. Практическое задание Опыт №1. Кислотный гидролиз сложных белков-нуклеопротеинов.
1 грамм дрожжей помещают в колбу на 100 мл, добавляют 20 мл 10% Н2О дист. и делают карандашом по стеклу отметку исходного объема смеси. Колбу закрывают пробкой с длинной стеклянной трубкой (обратный холодильник) и кипятят в течение 40 минут на асбестовой сетке при слабом нагревании. После окончания гидролиза содержимое охлаждают, доводят Н2О дист. до первоначального объема и фильтруют. С полученным фильтратом проделывают качественные реакции на составные части нуклеопротеинов.
Опыт №2. Качественные реакции на открытие составных частей нуклеопортеинов.
а) Биуретовая проба на пептиды.
К 5 каплям гидролизата приливают 10 капель 10% раствора NaOH и 1 каплю 1% раствора CuSO4.
б) Серебряная проба на пуриновые основания.
К 5 каплям гидролизата приливают 5 капель 2% аммиачного раствора азотнокислого серебра.
в) Качественная реакция Молиша на пентозную группировку.
К 10 каплям гидролизата прибавляют 2-3 капли 1% спиртового раствора тимола, перемешивают и по стенке пробирки осторожно приливают равный объем концентрированной серной кислоты.
г) Молибденовая проба на фосфорную кислоту.
К 5 каплям гидролизата приливают 5 капель молибденового реактива (раствор молибденовокислого аммония в азотной кислоте) и кипятят на спиртовке несколько минут.
ОЧЕНЬ НУЖНО
В опыте номер 1 нам нужно провести кислотный гидролиз дрожжей. Сначала возьмем 1 грамм дрожжей и поместим их в колбу на 100 мл. Затем добавим 20 мл 10% раствора соляной кислоты и сделаем отметку исходного объема смеси на колбе, используя карандаш или фломастер.
Далее закроем колбу пробкой с длинной стеклянной трубкой, которая называется обратным холодильником. Это необходимо для того, чтобы газы, образующиеся в ходе гидролиза, могли выйти из колбы, но при этом не допустить попадание воздуха.
Теперь нагреем колбу на асбестовой сетке при слабом нагревании в течение 40 минут. После окончания гидролиза остудим содержимое колбы, доведем объем до первоначального, используя дистиллированную воду, и профильтруем полученный раствор.
Теперь перейдем к опыту номер 2 - качественным реакциям на составные части нуклеопротеинов.
а) Первая реакция, биуретовая проба на пептиды. Возьмем 5 капель гидролизата и приливаем 10 капель 10% раствора гидроксида натрия (NaOH) и 1 каплю 1% раствора сульфата меди (CuSO4). Если в растворе есть пептиды, получим характерную фиолетовую окраску.
б) Вторая реакция, серебряная проба на пуриновые основания. Возьмем 5 капель гидролизата и приливаем 5 капель 2% аммиачного раствора азотно-кислого серебра. Если в растворе есть пуриновые основания, получим черные осадки серебра.
в) Третья реакция, качественная реакция Молиша на пентозную группировку. Возьмем 10 капель гидролизата и прибавим 2-3 капли 1% спиртового раствора тимола, перемешаем и по стенке пробирки осторожно приливаем равный объем концентрированной серной кислоты. Если в растворе есть пентозная группировка, то раствор окрасится в фиолетовый цвет.
г) Наконец, четвертая реакция, молибденовая проба на фосфорную кислоту. Возьмем 5 капель гидролизата и приливаем 5 капель молибденового реактива - раствор молибденовокислого аммония в азотной кислоте. Затем кипятим смесь на спиртовке несколько минут. Если в растворе есть фосфорная кислота, получим характерный желтый осадок.
Надеюсь, вам стало понятно, как проводить данные опыты и какие результаты ожидать. Если у вас возникнут еще вопросы, не стесняйтесь задавать их, я с удовольствием на них отвечу!